一步法无血清细胞冻存液(无DMSO)
成分与安全:
不含 DMSO,不含血清及动物源成分,化学组成明确,避免外源因子污染(如病毒、支原体)。
含保护性成分,减少冷冻损伤,提高细胞存活率(复苏活率>98%)。
DMSO 对细胞有毒副左右,在复苏和冻存该过程中,对细胞都有影响,我公司该产品,不含 DMSO,于DMSO 敏感细胞,有较好效果。
保存说明:
保存:4℃保存,一年有效;运输:冰袋(2-8℃)或蓝冰运输。
操作便捷性:
1. 无需程序降温:可直接将冻存管置于-80℃冰箱冷冻,省去传统梯度降温步骤。
2. 即用型配方:无需额外配制,简化实验流程。
3. 保存稳定性。
4. 冻存细胞可在-80℃保存 1-2 年,长期保存建议转移至液氮(>5 年)。
5. 冻存液本身在 2-8℃ 保存 12 个月。
操作步骤:
细胞冻存
细胞准备
1、选择对数生长期、状态良好的细胞,确保无污染。
2、贴壁细胞:消化成单细胞悬液(推荐含 EDTA 的胰酶)。
3、悬浮细胞:直接离心(300g,5-10 分钟)弃上清。
4、重悬与分装:
1) 用预冷的冻存液重悬细胞,调整浓度为 1×10⁶~1×10⁷/mL(推荐密度:2-5×10⁶/mL)。
2) 分装至冻存管(每管 1-1.5mL),避免室温停留超过 10 分钟。
5、冷冻保存:
1) 直接转移冻存管至-80℃冰箱,无需程序降温盒。
2) 长期保存:24 小时后转入液氮罐(气相液氮更佳)。
细胞复苏
快速解冻
1、从液氮或-80℃取出冻存管,37℃水浴轻摇至仅剩微小冰块。
2、稀释与离心:
1) 将细胞悬液转移至含预温培养基(体积为冻存液 9 倍)的离心管,轻柔混匀。
2) 离心(300g,5 分钟)弃上清,去除残留 DMSO。
3、接种培养:用新鲜培养基重悬细胞,接种至培养容器,24 小时后更换正常培养基。
注意事项:
1、细胞状态:冻存前确认细胞无污染且处于增殖旺盛期,避免使用衰老或过密细胞,最好是 1 天能传代一次。
2、操作时效性:冻存液与细胞混合后需迅速分装冷冻,避免长时间暴露于室温或 4℃。
3、安全防护:操作时需穿戴实验服及手套,避免直接接触皮肤。
4、保存条件:冻存液开封后建议分装,避免反复冻融;长期存放需严格密封。
5、适用性验证:首次使用特定细胞类型时,建议测试冻存效果(如保存时间、复苏活率)。
6、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
7、为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。








