背景描述 | IGROV-1细胞是从一名47岁女性患者的III期卵巢实体原发性肿瘤中建立的，IGROV-1细胞系是公认的耐药卵巢癌模型。IGROV-1细胞缺乏激素受体，对几种常见的化疗药物表现出低至中等的敏感性，同时对顺铂保持敏感。细胞包含3号染色体的近着丝粒倒位和2号和5号染色体之间的易位。细胞系表现出高突变，并且具有与子宫内膜样癌相似的总体突变特征。细胞在培养物中表现为融合的单层，并且在体内具有高度致瘤性，在裸鼠中15天内形成实体瘤。IGROV-1细胞的特点是表达玻连蛋白和αvβ3整合素，这是观察到的这些细胞向ECM蛋白迁移行为所必需的，并表达癌症相关的靶MDM2 Amelogenin：X;CSF1PO：11,12,13,14,15,16;D2S1338：17,25;D3S1358：13,14,15;D5S818：11,12,13;D7S820：9.1,10.1,11.1;D8S1179：13,14,15,16,17;D13S317：8,10;D16S539：10,11,12,13;D18S51：14,15,16;D19S433：13,14;D21S11：26,29.2,30.2;FGA：20,21,26;Penta D：8,10;Penta E：13,17;TH01：7,9.3;TPOX：8,11;vWA：16,17,20,21,22 |
注意事项 | 细胞接收后的处理： 1）收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。 2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。 3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。 1） 冻存细胞的复苏： 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。 2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。 对于贴壁细胞传代可以参考以下方法： 1.吸去培养液，加PBS清洗1-2遍，去PBS。加入0.25%胰酶2ml消化15秒，去胰酶。将培养瓶放37度培养箱，靠残余胰酶继续消化细胞3-10分钟直至细胞变圆（每3分钟观察一次。） 2.加12ml完全培养基，吹打均匀，即可分到2个T25培养瓶里。（细胞1传2，若顾客使用培养皿或培养孔板，建议先包被） 3）细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例； 1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×106~1×107个活细胞/ml. 2. 1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ，按每1ml冻存液含1×106~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。 3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。 备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1：2传代 。 |
